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如何紫外激發(fā)看不到GFP的熒光,選擇合適波長激發(fā)光源激發(fā)

作者:admina來源:時間:2020-12-10 16:17:47瀏覽量:2003人閱讀

  

激發(fā)光源常見問題解答


首先將激發(fā)光源固定在支架上,放入到超凈臺里面,因采用鋰電池供電,無需使用超凈臺電源也可工作,佩戴好配套的觀察眼鏡,打開光源開關(guān),即可進(jìn)行在無菌環(huán)境進(jìn)行愈傷組織的篩選。

激發(fā)光源的咨詢的客戶越來越多,現(xiàn)將咨詢比較多的問題解答如下?

如何在無菌環(huán)境下操作?

首先將激發(fā)光源固定在支架上,放入到超凈臺里面,因采用鋰電池供電,無需使用超凈臺電源也可工作,佩戴好配套的觀察眼鏡,打開光源開關(guān),即可進(jìn)行在無菌環(huán)境進(jìn)行愈傷組織的篩選。

如何拍攝GFP熒光照片?

將選擇的拍照濾鏡安裝到單反相機上面,設(shè)置合適的拍照模式,開啟激發(fā)光源,照射需要拍攝的應(yīng)該目標(biāo),對準(zhǔn)熒光目標(biāo),調(diào)整單反相機鏡頭,選擇需要拍照的GFP發(fā)光部位即可拍照,因公司的拍照濾鏡為62mm的濾鏡,如果單反相機鏡頭不是62mm,需要對應(yīng)的轉(zhuǎn)接環(huán)才能安裝。

具體相機設(shè)置可參考文章《單反相機如何拍攝熒光蛋白的表達(dá)》一文。

照射帶有GFP的愈傷組織

激發(fā)光源是五個波長還是2個波長?

激發(fā)光源是五個波段中可以選擇2個波段,一旦選擇好購買后,波段就無法更換,只能使用購買的兩個波段,無法自行更換。

YFP熒光蛋白的激發(fā)光到底是用450nm還是510nm?

經(jīng)常有客戶說自己用450nm激發(fā)光激發(fā)YFP,就能觀察到Y(jié)FP熒光,因為YFP的激發(fā)波段比較寬,從400-530nm,主峰是在510nm,用450nm或488nm波段能夠激發(fā)YFP黃色熒光蛋白發(fā)光,但如果用510nm的激發(fā)光源激發(fā),發(fā)出來的熒光會更亮,如果已經(jīng)有了450nm或488nm激發(fā)光源,也可以不用購買510nm的激發(fā)光源。

激發(fā)光源標(biāo)準(zhǔn)配置有哪些?

激發(fā)光源標(biāo)準(zhǔn)配置有主機(包含2個激發(fā)波段)、2個對應(yīng)的觀察眼鏡、交流適配器、鋁合金手提箱。

激發(fā)光源選配有哪些附件?

拍照濾鏡、臺式支架、濾鏡轉(zhuǎn)接環(huán)。

為什么有的文獻(xiàn)上寫的GFP要用紫外波段激發(fā)?

普通GFP激發(fā)主峰有2個,一個是紫外、一個是450nm,但增強型綠色熒光蛋白(EGFP)只有一個488nm激發(fā)主峰,如果你的是普通綠色熒光蛋白,你可以用高強度紫外線燈的紫外激發(fā),也可以用激發(fā)。但如果是增強型綠色熒光蛋白,紫外激發(fā)看不到GFP的熒光,用激發(fā)光源激發(fā)。

如何紫外激發(fā)看不到GFP的熒光,選擇合適波長激發(fā)光源激發(fā)

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